作為首位將基因編輯系統(tǒng)CRISPR用于哺乳動物細胞的開拓者，美國博德研究所華人科學家張鋒近來對RNA編輯產(chǎn)生了興趣，一月內(nèi)連發(fā)兩篇相關(guān)論文在頂級學術(shù)期刊。

美國東部時間10月25日，國際學術(shù)期刊《科學》發(fā)表了張鋒團隊一篇介紹CRISPR新系統(tǒng)“REPAIR”的文章。“REPAIR”的基本元件是一種取名為PspCas13b的酶和ADAR2蛋白。“REPAIR”可高效地修復(fù)RNA的單個核苷，因不會改變DNA信息而更為安全，將為基礎(chǔ)研究和臨床治療提供一個新的工具。

Cas13酶家族最近受張鋒團隊青睞。10月4日，在發(fā)表于《自然》期刊的論文上，張鋒團隊證實了另一種酶Cas13a能夠在哺乳動物細胞中特異性地下調(diào)內(nèi)源性RNA和報告RNA的水平。

“基因編輯的首要目標是矯正導致疾病的突變。現(xiàn)在，我們已經(jīng)很擅長讓基因失活，但要修復(fù)已丟失的蛋白質(zhì)功能則更具挑戰(zhàn)得多。編輯RNA這一新技能打開了更多的可能，幾乎可以在所有細胞中修復(fù)蛋白質(zhì)功能，有助于多種疾病治療?！睆堜h表示。

和此前CRISPR系統(tǒng)用于編輯DNA不同，張鋒團隊在普雷沃氏細菌（Prevotella）中找到了PspCas13b酶。這是Cas13酶家族中能使RNA失去活性的“佼佼者”，是潛在的RNA“剪刀”。

但張鋒團隊賦予PspCas13b的“使命”不是去讓RNA失活，相反的，他們設(shè)計了PspCas13b的“變體”。這個“變體”失去了“剪刀”的功能，但會牢牢地結(jié)合在特定的RNA片段上。同時，PspCas13b“變體”的搭檔——ADAR2蛋白會將該片段上的腺嘌呤核苷（A）替換成次黃嘌呤核苷（I）。

為何要做此替換？原來，鳥嘌呤核苷（G）突變?yōu)橄汆堰屎塑眨ˋ）時有發(fā)生，而這被認為和杜氏肌營養(yǎng)不良癥、帕金森病等疾病密切相關(guān)。

人類的很多疾病信息都編碼在DNA這個“生命腳本”上?；蚓庉嫾夹g(shù)的出現(xiàn)使得科學家有了修改DNA的可能，給治愈疾病帶來希望。但由于基因承載著生命最根源的信息，對DNA進行編輯有著安全和倫理上的顧慮。

RNA編輯有所不同。RNA是以DNA單鏈為模板的遺傳信息載體。DNA發(fā)出 “錯誤指令”，經(jīng)RNA轉(zhuǎn)錄，翻譯給蛋白質(zhì)并執(zhí)行功能，才有疾病的表現(xiàn)。若中途攔截，矯正RNA上的錯誤信息，讓蛋白質(zhì)接收到正確的信息，可起到治療效果。

安全和靈活是“REPAIR”的優(yōu)勢?！癛EPAIR無需篡改基因組就可以修復(fù)突變。而且RNA會自動降解，對它的修改或是可逆的。”張鋒實驗室學生、該論文的共同第一作者David Cox表示。

為了讓“REPAIR”更加成熟，張鋒團隊對其進行了優(yōu)化，設(shè)計出“REPAIR2”版本，將在轉(zhuǎn)錄組中可檢測到的脫靶次數(shù)從1.8萬次降至20次。據(jù)介紹，“REPAIR2”對目標RNA的編輯效率為20%-40%，最高達到51%。

為驗證“REPAIR”系統(tǒng)在疾病治療上的潛力，張鋒團隊人工合成了會造成范科尼貧血和X連鎖性腎源性尿崩癥的突變，并將這些突變引至人體細胞中，最后成功通過“REPAIR”在RNA層次上修復(fù)了致病突變。

接下來，張鋒團隊表示將繼續(xù)從自然界尋找線索，設(shè)計其他附件，適用于更多類型的核苷酸修復(fù)。