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基于自然行為的新物體識(shí)別模型,為研究嚙齒動(dòng)物記憶提供非侵入性方法

2024-05-13 17:02
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背景:

新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)是在模仿測(cè)試人類失憶癥的識(shí)別任務(wù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,評(píng)價(jià)的是嚙齒動(dòng)物對(duì)物體的識(shí)別記憶能力。小鼠天生的好奇心和對(duì)新事物的探索欲望。實(shí)驗(yàn)開始時(shí),小鼠被放置在一個(gè)充滿兩個(gè)相似物體的環(huán)境中,以便它們能夠熟悉這些物體。在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間后,其中一個(gè)物體被替換成一個(gè)新的未知物體。小鼠在這一環(huán)境中的行為將被觀察和記錄,特別是它們是否能夠識(shí)別到環(huán)境中的變化。 

小鼠新物體識(shí)別模型 示意圖

該模型是建立在嚙齒動(dòng)物對(duì)新異物體的自發(fā)探索行為的基礎(chǔ)上,且該模型不像迷宮學(xué)習(xí)中必須剝奪動(dòng)物飲食或在避免水淹動(dòng)機(jī)下進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶,也不像被動(dòng)回避測(cè)試中給予動(dòng)物電擊等負(fù)性強(qiáng)化讓動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶。所以該模型最大的優(yōu)點(diǎn)就在于可以讓動(dòng)物在完全自然的狀態(tài)下進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶測(cè)試,能夠更好地模擬人類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶行為。新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)給藥結(jié)束后進(jìn)行新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn),檢測(cè)小鼠認(rèn)知記憶水平。利用動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡跟蹤系統(tǒng)詳細(xì)地跟蹤鼠類動(dòng)物的鼻尖來(lái)實(shí)現(xiàn)新物體識(shí)別試驗(yàn)。自動(dòng)測(cè)量和分析大量的參數(shù),在新物體認(rèn)知能力試驗(yàn)中,測(cè)量和比較動(dòng)物對(duì)新物體和熟悉物體在興趣程度上的差別。VisuTrack動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡跟蹤系統(tǒng)是識(shí)別鼠類動(dòng)物的鼻尖的理想工具。 

實(shí)驗(yàn)步驟: 

根據(jù)嚙齒類動(dòng)物具備對(duì)新的物體有探索的偏好本能,故在電針后對(duì)小鼠進(jìn)行新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn),以反映小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。實(shí)驗(yàn)分為適應(yīng)期、訓(xùn)練期和測(cè)試期。1)適應(yīng)期:造模前1d將小鼠置于1個(gè)60cm×60cm×40cm的測(cè)試箱中自由探索5min,探索完畢后將小鼠取出,放回籠中。每次更換動(dòng)物前應(yīng)清理測(cè)試箱中小鼠的糞尿,并用75%酒精噴灑、擦拭以消除氣味。2)訓(xùn)練期:造模前將2個(gè)完全相同的圓柱體A和B放置在測(cè)試箱的左下角和右下角,將小鼠背對(duì)兩個(gè)物體放入測(cè)試箱中,讓小鼠在測(cè)試箱內(nèi)自由探索5min。3)測(cè)試期:造模第二天將左下角的物體A取出,換為新的正方體C,打開錄像設(shè)備,放置小鼠進(jìn)入測(cè)試箱,物體識(shí)別測(cè)試時(shí)間為5min。視頻由安裝在測(cè)試區(qū)域上方的攝像機(jī)錄制,當(dāng)動(dòng)物鼻尖朝向或接觸物體范圍的2cm左右時(shí),記錄為小鼠探索物體B的時(shí)間(TB)及探索物體C的時(shí)間(TC),并計(jì)算新物體識(shí)別指數(shù)。新物體識(shí)別指數(shù)=TC/(TB+TC)×100%。

VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件

數(shù)據(jù)分析:

這些數(shù)據(jù)可以通過以下方式分析:差異分?jǐn)?shù)(Discrimination Score):這是動(dòng)物探索新物體時(shí)間和探索舊物體時(shí)間差的度量。計(jì)算公式為:差異分?jǐn)?shù)=探索新物體的時(shí)間-探索舊物體的時(shí)間。正的差異分?jǐn)?shù)表明動(dòng)物能識(shí)別并更多關(guān)注新物體。辨別率(Discrimination Ratio):這是動(dòng)物探索新物體時(shí)間占探索總時(shí)間的比例。計(jì)算公式為:辨別率/新物體識(shí)別指數(shù)(%)=新物體探索次數(shù)(/新物體探索次數(shù)+舊物體探索次數(shù))×100%。辨別率大于0.5表明動(dòng)物更多地關(guān)注新物體。

文獻(xiàn)引用:

1. Involvement of lactate transport in two object recognition tasks that require either the hippocampus or striatum.[J]. Korol Donna L;;Gardner Robert S;;Tunur Tumay;;Gold Paul E.Behavioral neuroscience,2019

2. Ketamine enhances novel object recognition memory reconsolidation via the BDNF/TrkB pathway in mice.[J]. Fan JianFeng;Tang ZhenHui;Wang ShiYi;Lei Si;Zhang Bo;Tian ShaoWen.Physiology & behavior,2021

3. 王詩(shī)怡,許方,劉時(shí)彥,等.Apelin-13損傷大鼠新物體識(shí)別記憶再鞏固及其cAMP-乳酸通路機(jī)制研究[J].湘南學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2023,25(01):1-8.

4. Two cortical systems for memory-guided behaviour.[J]. Ranganath Charan;;Ritchey Maureen.Nature reviews. Neuroscience,2012 

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