水迷宮測試

Morris 水迷宮實驗系統(tǒng)由水迷宮裝置、水迷宮圖像自動采集和處理分析系統(tǒng)組成。圓形水迷宮水池直徑150 cm，高 50 cm，池壁以4 個等距離點(diǎn)，即東( E)、南( S) 、西 ( W) 、北( N) 將水池分為4個象限，分別在4個象限 的中心沿池壁設(shè)置4個入水點(diǎn)。圓柱形平臺放置于 SW象限的中心位置，并沒于水面下約2 cm，水溫(21 ±1)℃。訓(xùn)練時將大鼠分別從4個入水點(diǎn)頭朝池壁輕輕放入，水池上方1.5 m處安放著連接顯示系統(tǒng)的攝像機(jī)，通過處理分析系統(tǒng)分析可提供動物游泳的潛伏期(動物自入水到找到站臺后四 肢爬上站臺時所需的時間)、游泳距離、游泳軌跡等參數(shù)。大鼠在一個圓形水池（直徑120 cm，高50 cm）中，該水池包含一個直徑為10cm的隱藏平臺，將其放置在目標(biāo)象限中并淹沒在水面以下 1cm 處，將每只大鼠放入水中，面向池壁，給60s時間定位隱藏平臺，如果60s內(nèi)沒有找到平臺，則將其輕輕引導(dǎo)至平臺，并在那里停15s。測量到達(dá)平臺的時間和距離（逃逸潛伏期），可以反映空間學(xué)習(xí)的功能。連續(xù)5天每天進(jìn)行4次實驗，數(shù)字?jǐn)z像機(jī)記錄大鼠穿過平臺區(qū)域的次數(shù)和在目標(biāo)象限中花費(fèi)的時間。

水迷宮測試時間為第9~15天（每日上午8:30-12:00）。該次實驗分為兩部分：隱匿平臺獲得實驗及空間探索實驗。隱藏平臺獲得實驗：將小鼠置于水迷宮的房間適應(yīng)半小時，每只小鼠每天均訓(xùn)練4次，面向池壁將小鼠從東、南、西、北4個方向放入水中，記錄小鼠的逃避潛伏期；在60s內(nèi)還未找到平臺，將小鼠引至平臺，并記錄逃避潛伏期為60s。最后都讓小鼠在平臺停留15s，根據(jù)東、南、西、北4個方向的參照物進(jìn)行學(xué)習(xí)、記憶?？臻g探索實驗：訓(xùn)練第7天將平臺撤出，選擇入水點(diǎn)2個，把小鼠放入水中60s，測量：目標(biāo)象限滯留時間、游泳路程及速度。

Morris水迷宮實驗是評價動物空間學(xué)習(xí)記憶能力的重要手段，實驗裝置、訓(xùn)練時程、實驗時間、游泳時間、水溫等因素對水迷宮成績的影響。還有研究表明隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加至20－24次，空間學(xué)習(xí)能力可以達(dá)到飽和，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的狀態(tài)，而且每天訓(xùn)練次數(shù)增加，會使實驗動物學(xué)習(xí)能力提升較快，可以較快達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。

轉(zhuǎn)棒實驗（Rotarod test）

用來評估動物在轉(zhuǎn)桿上保持平衡的能力，隨著轉(zhuǎn)速提高，實驗動物維持平衡難度加大，以此檢測嚙齒類動物的運(yùn)動功能，轉(zhuǎn)棒可用于疲勞試驗、骨骼肌松弛試驗、中樞神經(jīng)抑制試驗和其他需要此運(yùn)動方式檢測藥物療效的試驗等。近年來，轉(zhuǎn)棒實驗已被逐漸用于疼痛研究中，將大鼠置于轉(zhuǎn)棒上，轉(zhuǎn)速從4r·min-1提高到40r·min-1，持續(xù)5min，強(qiáng)迫大鼠向前行走以免掉落，實驗前需連續(xù)訓(xùn)練2天，每天3次。步態(tài)實驗觀察了動物在不采取任何人為刺激下的自然步態(tài)變化，客觀評估其四肢的協(xié)調(diào)性和局部運(yùn)動功能等，而轉(zhuǎn)棒實驗則是評價動物的整體運(yùn)動能力。文獻(xiàn)報道，轉(zhuǎn)棒實驗已應(yīng)用于評價藥物對神經(jīng)病理性疼痛模型中運(yùn)動功能的影響。然而，在轉(zhuǎn)棒設(shè)備設(shè)計上的局限性，如通道寬度受限、轉(zhuǎn)桿離底座的高度有限，使得成年大鼠在慢性實驗中更易掉落或轉(zhuǎn)身，進(jìn)而中斷實驗并影響最終實驗結(jié)果。測試前，小鼠提前3d以10周/分進(jìn)行運(yùn)動適應(yīng)訓(xùn)練，每天20min。

跑步實驗

實驗前，小鼠進(jìn)行1w跑步機(jī)適應(yīng)性訓(xùn)練，讓其了解逃離帶電區(qū)域。第1天訓(xùn)練跑步時間為5min，以后每天遞增5min，第7天最終維持35min。第1天跑步速度設(shè)置為5m/min，以后每天遞增5m/min，最終維持25m/min。測試時，設(shè)置小鼠跑步運(yùn)動速度為25m/min，運(yùn)動持續(xù)時間35min，電流強(qiáng)度35A，記錄小鼠被電擊次數(shù)。