曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是經(jīng)典的情緒相關(guān)行為學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn), 最早由 Hall 設(shè)計(jì)。是用于檢測(cè)動(dòng)物在陌生環(huán)境中的行為表現(xiàn),包括自發(fā)活動(dòng)行為和探索行為,是評(píng)價(jià)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。檢測(cè)指標(biāo)為動(dòng)物首次進(jìn)入中央?yún)^(qū)的潛伏期、中央?yún)^(qū)停留時(shí)間和穿行次數(shù);結(jié)合抑郁模型可檢測(cè)動(dòng)物的“抑郁樣”行為和藥物的抗抑郁作用,檢測(cè)指標(biāo)為動(dòng)物的開(kāi)場(chǎng)活動(dòng)性,可人工計(jì)數(shù)動(dòng)物的水平爬格次數(shù)和垂直站立次數(shù)作為行為指標(biāo),也可采用自動(dòng)攝像記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡,并采用行為學(xué)分析軟件進(jìn)行分析運(yùn)動(dòng)距離、運(yùn)動(dòng)速度、休息時(shí)間等行為指標(biāo)。該實(shí)驗(yàn)亦可用于評(píng)價(jià)抗抑郁藥物的起效速率。

實(shí)驗(yàn)材料

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱通常分為大鼠和小鼠兩種規(guī)格，其中大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱建議尺寸為100cm*100cm*40cm，小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱尺寸建議為50cm*50cm*40cm。實(shí)驗(yàn)箱材質(zhì)采用黑色或者白色單面磨砂亞克力為宜，也可以使用中性顏色（如藍(lán)色）的醫(yī)用ABS工程塑料，內(nèi)壁不可反光。

- 大小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱，型號(hào)：XR-XZ301，上海欣軟 -

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的分析軟件可使用VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件（上海欣軟），自動(dòng)跟蹤目標(biāo)老鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡，識(shí)別動(dòng)物的頭部、重心及尾巴，直接生成活動(dòng)軌跡圖、區(qū)域偏好指數(shù)圖和活動(dòng)量熱圖等。

Tip：很多老師也可以自制這樣的儀器，很簡(jiǎn)單，但需要注意實(shí)驗(yàn)箱體高度不能太高，容易造成角落光線不均勻。另外，實(shí)驗(yàn)箱底部的顏色盡量保持與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的差異性，方便軟件更好的識(shí)別動(dòng)物。如果實(shí)驗(yàn)室購(gòu)買了VisuTrack動(dòng)物動(dòng)物行為分析軟件，不需要在實(shí)驗(yàn)箱底部劃分小方格了，VisuTrack軟件里可以自動(dòng)劃分。

實(shí)驗(yàn)方法

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,在用于抑郁行為學(xué)評(píng)價(jià)中,無(wú)適期階段,操作步驟如下 :

(1) 實(shí)驗(yàn)前,動(dòng)物應(yīng)適應(yīng)檢測(cè)環(huán)境 30 ~ 60 min；

(2)實(shí)驗(yàn)人員在VisuTrack軟件中預(yù)先設(shè)置好相應(yīng)的參數(shù)，記錄好動(dòng)物的編號(hào)、日期、狀態(tài)信息；

(3) 動(dòng)物放入測(cè)試箱后,即開(kāi)始檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間宜為5~10 min;

(4) 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)從同一位置同一方向?qū)?dòng)物放入測(cè)試箱中央。

- 大小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱（簡(jiǎn)約版），型號(hào)：XR-XZ301-J，上海欣軟 -

評(píng)價(jià)指標(biāo)

(1) 總路程(total distance)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的物理位移累積；

(2) 速度(speed)：動(dòng)物在單位時(shí)間產(chǎn)生的物理位移。5min內(nèi)正常動(dòng)物總路程多為1000~2500cm,速度為3~8cm/ s。動(dòng)物出現(xiàn)抑郁行為時(shí),速度減少；

(3) 運(yùn)動(dòng)總時(shí)間(total move time)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的產(chǎn)生物理位 移時(shí)所需的時(shí)間累積。正常動(dòng)物運(yùn)動(dòng)時(shí)間多大于檢測(cè)時(shí)間的30%;抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比有顯著性減低(P0. 05)；

(4) 站立次數(shù)(number of standing)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的站立總次數(shù)。10min檢測(cè)時(shí)間,正常大鼠站立次數(shù) 20 ~ 50 次。10min檢測(cè)時(shí)間,空白對(duì)照組小鼠站立次數(shù) 60~130次；抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比顯著減低 (P 0. 05)。

（5）糞便數(shù)量反應(yīng)大鼠的焦慮情況。（VisuTrack軟件是目前市面上唯一一款能夠自動(dòng)檢測(cè)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱中糞便數(shù)量的動(dòng)物行為學(xué)分析軟件）

注意事項(xiàng)

1、實(shí)驗(yàn)前需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每天撫摸1-2min以減少非特異性應(yīng)激刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)中的影響。

2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要弱光照明，觀察者盡量與測(cè)試動(dòng)物分隔。

3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要環(huán)境安靜。

4、進(jìn)行曠場(chǎng)檢測(cè)時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行篩選，有些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在正常情況下水平方向或垂直方向的活動(dòng)情況顯著低于同批動(dòng)物平均水平，則需要將這些動(dòng)物預(yù)先剔除。

5、實(shí)驗(yàn)前需要提前至少3小時(shí)將動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室，降低動(dòng)物對(duì)新環(huán)境的不安情緒。

6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別、周齡盡量保持一致，因?yàn)榧に厮娇赡軙?huì)影響動(dòng)物行為。

7、注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的晝夜節(jié)律，在24h內(nèi)有其活動(dòng)周期，盡量選擇同一時(shí)間段開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。

8、OFT實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物各方面影響較小，而其他行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（如強(qiáng)迫游泳、水迷宮、懸尾實(shí)驗(yàn)）影響較大，因此同一批動(dòng)物進(jìn)行不同行為學(xué)測(cè)試時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行OFT實(shí)驗(yàn)。

9、實(shí)驗(yàn)應(yīng)在隔音，光強(qiáng)度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

10、兩次實(shí)驗(yàn)之間清洗實(shí)驗(yàn)設(shè)備，以免上次動(dòng)物余留信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

引用參考

[1]姜寧[1],張亦文[1],姚彩虹[1],黃紅[1],劉新民[1],.大小鼠抑郁行為實(shí)驗(yàn)方法概述[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2021,29(6)

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